Equips de purificació per a la purificació d'Oligo

1. Purificació per cromatografia d'electroforesi en gel
Utilitzeu cromatografia d'electroforesi en gel de poliacrilamida desnaturalitzant per a la purificació.L'agent desnaturalitzant és generalment formamida 4M o urea 7M, la concentració d'acrilamida està entre el 5-15% i la proporció de metacrilamida es troba principalment entre el 2-10%.
Després de l'electroforesi, la posició de la banda d'àcid nucleic s'ha de determinar sota la irradiació de la llum ultraviolada, el gel que conté l'àcid nucleic objectiu es talla, l'àcid nucleic es trenca i es lixivia i, a continuació, la solució de lixiviació es concentra, es dessala, quantificat i liofilitzat.

2. DMT-On, purificació HPLC
Trieu el mode DMT-On durant la síntesi, el producte brut es va centrifugar i es va concentrar a temperatura ambient per eliminar l'excés d'amoníac després de l'aminòlisi.
La separació es va realitzar mitjançant una columna C18 amb acetonitril i àcid trietilamina-acètic al 10% (TEAA) com a eluent.Un cop completada l'elució, es concentra i, a continuació, s'elimina el grup DMT amb àcid trifluoroacètic.Després de la neutralització, s'eliminen algunes sals i petites molècules a través d'un tub tallat, i finalment es dessalin.

Amb aquest mètode es pot obtenir un producte de major puresa, però cal parar atenció a l'aparició de la depurinació.

3. DMT-Off, purificació HPLC
Trieu el DMT-Off durant la síntesi i el producte brut es va centrifugar i concentrar a temperatura ambient per eliminar l'excés d'amoníac després de l'amonòlisi.
La separació es va dur a terme mitjançant una columna C18 amb acetonitril i àcid trietilamina-acètic al 10% en aigua com a eluent.Un cop completada i quantificada la separació, les alíquotes es liofilitzen.

Aquest mètode requereix un ajust acurat de les condicions de separació i també pot obtenir molècules diana relativament pures.